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有濟模型 | 血栓類疾病動物模型

血管損傷引起的血栓形成是一個重要的臨床問題,血栓形成可以引起大多數血管疾病并發癥,而血管血栓并發癥是導致人類死亡的主要原因之一。血栓的形成是復雜的,涉及血管損傷部位的許多分子相互作用和細胞類型的整合[1]。因此,使用體外或計算機模擬策略對這種復雜反應進行建模是不夠的,體內血栓形成模型的使用為血管血栓形成新療法的發現和初步試驗提供了重要的工具。


血栓動物模型主要包括動脈和靜脈血栓,方法可分為物理損傷法和化學損傷法兩大類。有濟醫藥心血管與神經藥效技術平臺血栓類模型藥效學研究領域深耕多年,已成熟建立多種體內血栓形成模型,驗證數據穩定并具備多項IND評價項目經驗,可助力合作伙伴開展血栓類疾病藥物臨床前藥效評價。


部分模型數據展示:






一、化學損傷法


化學損傷法是使用一些特殊化學試劑(三氯化鐵、角叉菜膠、月桂酸鈉、胰蛋白酶、鏈霉蛋白酶、過氧化氫等)后使內膜受損而形成血栓,不同化學物質作用最后形成的血栓成分也稍有差異。其中最常用的是FeCl3形成法,此方法操作簡單、重復性好,最終形成的血栓結構接近于人類自發形成的血栓結構。該方法通常適用于小鼠下腔靜脈血栓模型、腦血栓模型[2]

案例分享:FeCl3誘導小鼠下腔靜脈血栓模型
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二、物理損傷法


物理損傷法是指通過一些損傷性方法破壞血管內膜,使內皮下膠原纖維暴露,從而激活血小板且釋放多種生物活性物質,最終啟動內源性和外源性凝血途徑導致血栓形成。主要包括以下幾種方法:


1.電刺激誘導模型

通過在血管外壁施加電流,電刺激引起內皮細胞損傷并導致血栓形成[3]。在靜脈血管及動脈血管中均適用,包括頸動脈、下腔靜脈等。該模型制作方法簡單,但易受動物年齡、環境溫度的影響,采用本方法復制的大鼠頸動脈血栓與人類動脈血栓在組織形態結構上相似,適用于抗血栓形成藥物篩選方面的研究。


案例分享:
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2.手術結扎法


手術阻斷血流后,受阻的血小板與局部形成的凝血因子相互作用,加上缺氧受損的內皮細胞引發的內源性凝血系統,最終導致血栓的形成。實驗大鼠開腹后分離下腔靜脈,于左腎靜脈下方用絲線結扎下腔靜脈,然后縫合腹腔。結扎后2~6h形成血栓,取出血栓烘干后稱量血栓質量,以血栓質量或血栓形成百分率作為評價指標。該模型多用于溶栓藥物體內抗血栓作用的評價。

案例分享:

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3.機械損傷法


是指用微型刮匙、銀針等器械刮傷血管內膜,使內皮下細胞外基質裸露促使血小板與膠原接觸而被激活和粘附,啟動凝血過程導致血栓形成。通常采用家兔,麻醉后分離股動脈用微型血管夾夾住上下兩端,中間留一定長度的血管,然后用微型刮匙搔刮血管內膜,術后24h即開始有血栓形成,以血栓重量為評價指標[4]


結語


血栓類動物模型在探究凝血機制以及藥物篩選和藥效學評價方面扮演了重要角色,為支持血栓性疾病治療的藥物開發提供了可靠的實驗基礎。目前已經發展出多種成熟的動物血栓模型,鑒于每種血栓模型都有其獨特特點,因此在選擇和應用血栓動物模型時,應根據研究目的和需求選擇適當的方法。


有濟醫藥深耕心腦血管藥效學研究領域,且平臺配備科學、先進的儀器設備,能夠提供全面的血栓類動物模型的藥效評價以及相關的機制研究服務,滿足不同實驗室的需求。若您有相關需求,歡迎于有濟醫藥微信公眾號在線咨詢,我們的專業團隊將竭誠為您服務!


參考文獻:

[1] Bodary PF, Eitzman DT. Animal models of thrombosis. 2009 Sep. 

[2] Li W, Nieman M, Sen Gupta A. Ferric Chloride-induced Murine Thrombosis Models. 2016 Sep 5.
[3] Huang Y, Nie X, Liu X, Liu Y, Yu H, Gao X. Development of a highly-efficient erythrocyte-drug covalent conjugation platform and its use in treating thrombotic disorders. 2023 Nov.
[4]  陳鐵軍,陳瑞芳,果杰.一種家兔股動脈血管內制作血栓模型的簡便方法.實驗動物科學與管理199714(2):33-34











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