藥物相互作用（Drug-Drug Interaction，DDI）研究貫穿新藥研發(fā)的整個周期，是指導(dǎo)臨床聯(lián)合用藥、優(yōu)化藥效方案以及指導(dǎo)個體化治療的重要依據(jù)。

藥物相互作用從機制上可劃分為：

① 藥代動力學(xué)相互作用：影響藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄；

② 藥效動力學(xué)相互作用：影響藥物與受體的相互作用，改變其藥理效應(yīng)。

本文將從藥物的性質(zhì)、研究階段，不同指導(dǎo)原則要求等方面介紹轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的藥代動力學(xué)相互作用研究策略，對于代謝酶介導(dǎo)的DDI研究策略可參考我們之前發(fā)布的文章（ICH M12新規(guī)深度解讀：代謝酶介導(dǎo)的DDI研究策略全面升級）。

下表總結(jié)了不同類型藥物在不同的研發(fā)階段對于轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的DDI研究的內(nèi)容及要點。

基于轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的藥物相互作用研究，歐洲藥品管理局（EMA）、美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）、中國國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）分別在2013年、2020年、2021年頒布了相應(yīng)的藥物相互作用指導(dǎo)原則。為了減少企業(yè)在滿足多個監(jiān)管機構(gòu)要求時面臨的不確定性，國際人用藥品注冊技術(shù)協(xié)調(diào)會（ICH）在2024頒布了藥物相互作用研究的指導(dǎo)原則（ICH M12），該指導(dǎo)原則同樣也建議在研藥物開展轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的相互作用研究。

本文將進一步探討和比較ICH M12中對于體外轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的藥物相互作用評價的變更點并進行總結(jié)分析，進一步明確體外轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的DDI研究的評價標(biāo)準(zhǔn)。

轉(zhuǎn)運體在體內(nèi)不同部位廣泛分布，是介導(dǎo)藥物吸收、分布、代謝、排泄的關(guān)鍵因素，主要分為：

① ABC轉(zhuǎn)運體家族（ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體）：包括P-糖蛋白（P-gp）、乳腺癌耐藥蛋白（BCRP）、多藥耐藥相關(guān)蛋白（MRP）、膽汁鹽輸出泵（BSEP）等；

② SLC轉(zhuǎn)運體家族（溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運體）：包括有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽（OATP1B1/1B3/2B1）、有機陰離子轉(zhuǎn)運體（OAT1/3）、有機陽離子轉(zhuǎn)運體（OCT1/2）以及多藥及毒性化合物外排轉(zhuǎn)運蛋白（MATE1/2-K）等。

如下圖總結(jié)了不同轉(zhuǎn)運體的類型和主要表達(dá)部位：

對于轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的DDI研究，主要研究：

① 轉(zhuǎn)運體對在研藥物的轉(zhuǎn)運作用；

② 在研藥物對轉(zhuǎn)運體的抑制作用；

③ 目前評價對轉(zhuǎn)運體誘導(dǎo)的體外方法尚不完善，未要求開展藥物對于轉(zhuǎn)運體的誘導(dǎo)作用。

ABC轉(zhuǎn)運體在底物轉(zhuǎn)運的過程中需要依賴ATP水解提供能量，其ATP的結(jié)合位點通常位于細(xì)胞內(nèi)，主要介導(dǎo)底物的外排。目前已鑒定出的ABC轉(zhuǎn)運體有40多種，其中多藥耐藥（Multidrug Resistance, MDR）轉(zhuǎn)運體由于其在藥物耐藥和生理功能中的廣泛作用，已成為研究最廣泛的ABC轉(zhuǎn)運體，主要包括：P-gp，BCRP，MRPs等，也是各指導(dǎo)原則中推薦在藥物研發(fā)階段主要關(guān)注的ABC轉(zhuǎn)運體。

P-gp和BCRP：

其他ABC轉(zhuǎn)運體（如BSEP、MRP2）：根據(jù)藥物的作用部位、吸收和消除途徑等綜合考慮，根據(jù)具體的情況分析是否需要進行研究。其中MRP2和BSEP是研究比較廣泛的轉(zhuǎn)運體。

MRP2是主要分布在腸道及肝臟的外排轉(zhuǎn)運體，通常在肝細(xì)胞基底膜和腎近曲小管上皮細(xì)胞等極性細(xì)胞的頂膜上表達(dá)。它參與多種毒性復(fù)合物的轉(zhuǎn)運，調(diào)節(jié)酸性配基的分泌，保護機體免受毒性陰離子的傷害。MRP2還是膽汁流的重要推動力，能促進膽汁的分泌和增加膽汁酸鹽的脂溶性；MRP2的表達(dá)下調(diào)與炎癥細(xì)胞因子的過度釋放和肝臟損傷密切相關(guān)。

BSEP是主要分布在肝細(xì)胞膽管側(cè)膜的外排轉(zhuǎn)運體，是肝細(xì)胞分泌膽酸鹽進入膽汁的主要轉(zhuǎn)運體，其變異和功能抑制與許多膽汁淤積癥和藥致肝損傷有關(guān)。

（1）試驗系統(tǒng)

不同的監(jiān)管機構(gòu)對于開展ABC轉(zhuǎn)運體的研究均推薦了相應(yīng)的試驗系統(tǒng)，下表總結(jié)和比較了ICH M12及其他監(jiān)管機構(gòu)（FDA、NMPA）對于開展體外ABC轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的DDI研究的試驗系統(tǒng)的異同點。

（2）ABC轉(zhuǎn)運體對在研藥物的轉(zhuǎn)運作用

下表總結(jié)和比較了不同監(jiān)管機構(gòu)對于ABC轉(zhuǎn)運體底物研究的方法及評價標(biāo)準(zhǔn)。ICH M12中刪除了對于特異性抑制劑濃度的限制，在實際執(zhí)行過程中需要在體系驗證和試驗過程中合理設(shè)置特異性抑制劑濃度。

（3）在研藥物對ABC轉(zhuǎn)運體的抑制作用

在ICH M12指導(dǎo)原則中強調(diào)了以游離藥物進行評價，更符合實際的生理狀態(tài)；另外，如果在研藥物的代謝產(chǎn)物是轉(zhuǎn)運體抑制劑或者在研藥物經(jīng)胃腸道外給藥，其對于P-gp及BCRP抑制作用評價的臨界值發(fā)生改變，較FDA及NMPA要求更嚴(yán)格。因此，建議以ICH M12中的臨界值作為推測臨床人體中藥物對ABC轉(zhuǎn)運體可能具有抑制作用的評估依據(jù)。

在藥物研發(fā)階段主要關(guān)注以下SLC轉(zhuǎn)運體：

OATP1B1和OATP1B3：

① 重要的肝臟攝取轉(zhuǎn)運體，主要分布在肝細(xì)胞的基底側(cè)，影響藥物的肝臟代謝和膽汁排泄；

② 如藥物通過肝臟代謝或膽汁排泄在藥物的消除中占比≥25%，或者藥物的藥理學(xué)靶點在肝臟，則應(yīng)考察在研藥物是否為OATP1B1和1B3的底物。

OAT1/3、OCT2及MATE1/2-K：

①主要分布在腎臟，其中OAT1/3、OCT2主要分布在腎臟近端小管（基底外側(cè)膜），MATE1/2-K主要分布在腎臟近端小管（刷狀緣膜），參與藥物的腎臟主動分泌；

② 如果藥物的腎主動分泌清除率≥系統(tǒng)清除率的25%，則應(yīng)考慮對藥物進行體外研究，評價藥物是否為這些轉(zhuǎn)運體的底物。

其他SLC轉(zhuǎn)運：根據(jù)藥物的作用部位、吸收和消除途徑等綜合考慮，根據(jù)具體的情況分析是否需要進行研究。

（1）試驗系統(tǒng)

對于SLC轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)DDI的體外評價體系，各監(jiān)管機構(gòu)的建議較為一致，一般建議采用轉(zhuǎn)染細(xì)胞系開展，除了轉(zhuǎn)染細(xì)胞系外也推薦采用懸浮或貼壁的人肝細(xì)胞進行研究。

（2）SLC轉(zhuǎn)運體對在研藥物的轉(zhuǎn)運作用

下表總結(jié)和比較了不同監(jiān)管機構(gòu)對于SLC轉(zhuǎn)運體底物研究的方法及評價標(biāo)準(zhǔn)。與ABC轉(zhuǎn)運體相同，在ICH M12中刪除了對于特異性抑制劑濃度的限制，在實際執(zhí)行過程中需要在體系驗證和試驗過程中合理設(shè)置特異性抑制劑濃度。

（3）在研藥物對SLC轉(zhuǎn)運體的抑制作用

在體外研究中，通過測試不同濃度的在研藥物對SLC轉(zhuǎn)運體攝取/外排作用抑制的IC₅₀值，評價在研藥物對轉(zhuǎn)運體的抑制作用。不同監(jiān)管機構(gòu)對于通過體外試驗數(shù)據(jù)評估在研藥物對人體轉(zhuǎn)運體的抑制作用的臨界值進行了規(guī)定，總結(jié)及比較見下表。在ICH M12指導(dǎo)原則中對于MATE1/MATE2-K抑制作用評價的臨界值發(fā)生改變，較FDA及NMPA要求更嚴(yán)格。